用途： 沙门氏、金黄色葡萄、志贺、大肠杆菌、副溶血、单增李斯特和蜡样芽孢菌检测

产品特点 Features

本试剂盒采用多重荧光PCR技术，针对食品中常见7种致病菌特有的基因的序列，设计不同荧光标记的探针，通过荧光信号的变化检测食品中是否含有特定的致病菌。该试剂盒适用于多种样本（如食品、食品原料、水产品、牛奶和奶制品、饮料、酒类和化妆品等）中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、大肠杆菌、副溶血弧菌、单增李斯特氏菌和蜡样芽孢杆菌等7种重要致病菌特异性基因的检测。

储存条件及有效期：试剂盒置于-20℃冰箱中冻存，试剂盒有效期为一年。

操作流程 process

食品中常见7种致病菌荧光PCR检测试剂盒操作流程：

1）从试剂盒中取出水、PCR反应液、P溶液、阳性和阴性核酸对照，室温融化，置冰箱4℃待用。

2）在1克待检食品样本中加入5 mL水，研磨后，3000 g离心3 min,取上清200 μL用柱法或磁珠法提取细菌基因组DNA，并溶于50 μL水中。

3）反应体系配制：试剂使用前，振荡混匀，3000rpm离心2秒。

在0.2mL平盖PCR薄壁管或平盖PCR八联管中，按上述加样量配制反应体系液（阳性和阴性对照管同样配制，待检DNA溶液换为试剂盒提供的阳性核酸对照和阴性核酸对照，加样量分别为3μL），盖好管盖，去除管中气泡，并用离心机甩离，确保所有液体都在管底。将PCR 管放入荧光PCR检测仪中。

4）荧光PCR检测仪循环条件设定。

产品细节 Details

技术参数 parameter

质控标准：

阴性对照的CT值应等于None；同时阳性对照的CT值应小于30。

否则，此次试验视为无效。（CT值应以S型曲线拐点的循环数为准）

结果判定：

1）CT值为None的样本判定为阴性；CT值小于等于38的样本判定为阳性。

2）CT值大于38的样本建议重做。重做后样本CT值小于等于38则判定为阳性，否则判定为阴性。

3）如果样品志贺氏菌阳性，则P2溶液反应管中FAM和VIC/HEX通道均有扩增曲线。

4）对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样本，应判定为阴性。

实验案例展示